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HEK-293T細(xì)胞簡(jiǎn)介

HEK-293T細(xì)胞簡(jiǎn)介
  HEK-293T細(xì)胞極少表達(dá)細(xì)胞外配體所需的內(nèi)生受體,且比較容易轉(zhuǎn)染,是一個(gè)很常用的表達(dá)研究外源基因的細(xì)胞株。293細(xì)胞的一個(gè)衍生株:293T/17的轉(zhuǎn)染效率更高,成為廣大研究者研究基因功能的一個(gè)強(qiáng)大工具。
  HEK-293T細(xì)胞的缺陷是生長(zhǎng)過(guò)程中貼壁強(qiáng)度比較小。所以在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中容易流失,從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如果一個(gè)實(shí)驗(yàn)室新得到的293細(xì)胞是郵寄得到的并且細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中,就需要讓細(xì)胞沉降幾天時(shí)間,因?yàn)榇罅考?xì)胞會(huì)漂浮在培養(yǎng)液里。
  來(lái)源:人體腎臟 形態(tài):上皮細(xì)胞 生長(zhǎng)特性:貼壁 注釋:該細(xì)胞含腺病毒5 DNA 。
  培養(yǎng)液: MEM( 含 2 mM L-谷氨酰胺 和 Earle's BSS,1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸, 1.0 mM 丙酮酸鈉), 10% 馬血清(熱滅活)。
  傳代: 吸去培養(yǎng)液。 用0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次,以去除血清(血清會(huì)抑制胰酶的活性)。 加2-3毫升Trypsin-EDTA,放在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)約5分鐘,直到細(xì)胞全部脫落。 加6-8毫升培養(yǎng)液,用移液器把細(xì)胞吹散。 加適量的細(xì)胞到新的培養(yǎng)器皿中。(以1:2到1:4為宜,傳代期間培養(yǎng)液2-3天更換1次)

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